皮下 真率いる反社会組織・タンポポを殲滅し「夜桜前線」を見事完遂コンプリート。
さらに太陽と六美の結婚披露宴も無事に行われ、平穏な日常を送っていた夜桜家
…だったが、新たな任務が発生――!?
ある日、太陽は夢の中で夜桜家初代当主の夜桜つぼみと対話する。
彼女が告げたのは「私を殺して」という願いと、２つの必要なもの。
つぼみの言葉に従い、そのカギを握る皮下との接触をするため太陽は銀級シルバーランクスパイ試験に挑戦するが、「今年の合格者は０」と噂される最凶試験官たちが待ち受ける！

そしていよいよ、動き出したのは不敵な笑みを浮かべる六美たちの父・夜桜 百。
謎に包まれた彼の目的とは!?

夜桜家に降りかかる様々な事件！
試されるのは家族の絆!!
TVアニメ『夜桜さんちの大作戦』新章、作戦開始ミッションスタート!!!